本人于2009年考上博士,准备做与表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药机制的课题。根据文献报道,选购了人肺腺癌NCI-H1650和NCI-H1975两株细胞。这两个细胞在我没进入实验室之前,前辈在2008年在北京某个大细胞库买的。于是我就用这两个细胞做实验,第一步就是检测细胞是否有EGFR突变,按照文献报道是有的。NCI-H1975很快就检测出来了,合格。NCI-H1650就很怪了,怎么检测也检测不出来,更奇怪的是检测前一步扩增也不出。各种对照,各种改变都不行,我只好一边诱导,一边等。做MTT也发现,NCI-H1650细胞对吉非替尼也不敏感。实验做了半年也没有结果,分子生物学实验的师妹是毫无办法了,我综合一分析,不对啊,只能是细胞株的问(神魔养殖场作者为什么坐牢?《神魔养殖场》的作者黑瞳王之所以会坐牢,是因为作者的小三不满作者离婚后与前妻之间仍有来往,便毒杀发妻,作者包庇小三,又被小三供出毁灭电子证据,判处有期徒刑2年半。)题了,我估计这个细胞株根本就不是人的,更别说是不是肺癌的了。于是查阅资料,从上海某个大细胞库买了NCI-H1650和HCC-827两株细胞,我一看,NCI-H1650形态与在北京买的不一样,有门!马上进行检测,这次NCI-H1650细胞突变正确,但是HCC-827的没有突变。我修正实验,我不断修正。因为细胞株的问题我耽误了差不多一年的实验时间。今年好不容易毕业啊!导师让我帮着带带硕士小师妹,我查阅文献,看国内做PC-9的很多,决定买PC-9细胞,这次改变战略,不从细胞库买了,从公司买,应该能准点。在上海某公司买了,邮到后恢复状态,又冻了两管,马上测序去,失望啊,还是没有EGFR19外显子的突变啊。赶紧上网找资料,一看人家做的PC-9细胞和我们的形态都不一样。还好这次给退款了。 因此,我总结在国内买到真细胞的几率是非常低的,我们买了5株次,但是只买到了2个真的,几率为40%。建议,要做细胞株的同学要在国内买,要看足够的文献,找到准确的形态,买之前先让人家发个照片,形态合格后再确定是否买;如果有钱,直接从ATCC买吧,国内也有代理。