实验四 肉制品中亚硝酸盐含量的测定 重氮化偶合比色法 一、 实验目的 掌握肉制品中亚硝酸盐含量的测定方法和卫生评定。 二、实验原理 亚硝酸盐在酸性溶液中与格氏试剂中的对氨基苯磺酸重氮化作用生成的重氮化合物与 萘胺发生偶合反应生成紫红色的偶氮化合物。颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比故可以其显色度与已知量的亚硝酸盐标准溶液比较定量。 三、器材与试剂 分光光度计、纳氏比色管 饱和升汞溶液格氏试剂亚硝酸盐标准使用液2 g/mL 盐酸 四、操作方法 1、样液的制备 准确称取剪碎的样品约 5.0g 置于 250mL 烧杯中 加 100mL 水 混匀 加热至约 80℃移入 250mL 容量瓶中用水数次洗涤烧杯洗液注入容量瓶中加水至容量瓶的 2/3 容积置沸水浴中加热 1h不时振摇然后加 5mL 饱和升汞溶液冷却再加水至刻度混匀过滤滤液备用。 2、测定 取 6 支清洁干燥的 5(歧义是什么意思？歧义句意思就是：句子可以这样理解，也可以那样理解，但却不能确定究竟要表达哪种意思。)0mL 纳氏比色管编号后 5 个标准管中分别加入 0、1、2、3、4mL亚硝酸钠标准使用液相当于 0、2、4、6、8 g 亚硝酸钠 样品管中加入 5mL 上述滤液各管均加水至 50mL 刻度处混匀。 然后分别加入 2 滴盐酸溶液和 2mL 格氏试剂 混匀 37℃加热 20 min用 1 ㎝石英比色杯以零管调节零点于波长 525nm 处测吸光度绘制标准曲线比较。 编号 成分 2 g/mL 亚硝酸盐标准使用液mL 样品滤液mL 相当于亚硝酸盐含量 g/mL 加水至 50mL 刻度处混匀 盐酸滴 格氏试剂mL 混匀37℃水浴加热 20min 吸光度OD525nm 标准管 2 2 样品管 5 / 0 0 1 1 3 3 4 4 / 0 / 2 / 4 / 6 / 8 5 A1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 3、计算 X11121115010001000mAVVmA 式中X1 样品中亚硝酸盐含量mg/㎏  m1 样品质量g  A1 从标准曲线测得样液中亚硝酸盐含量 g  V1 样品处理滤液总体积mL  V2 测定时取用样品滤液体积mL 。 4、判定标准 香肠腊肠 、香肚、广式腊肉、火腿 20mg/kg 肉灌肠、肴肉、咸猪肉 30mg/kg 腌腊肉制品罐头包括午餐肉、咸牛肉、咸羊肉、火腿猪肉、猪肉香肠等 50mg/kg 西式蒸煮、烟熏火腿、西式火腿罐头 70mg/kg 五、结果分析与讨论 1、 数据结果吸光度值 2、 制作标准曲线 3、 计算样品中亚硝酸钠含量 4、 综合判定